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La
précision d’une recherche de Cryptosporidium et Giardia varie de façon
significative en fonction de la composition de l’échantillon, de la méthode de
détection et de la technicité des opérateurs à la mettre en œuvre.
L’utilisation
de ColorSeed™ permet de mesurer avec précision les pertes en
cystes et oocystes lors de la préparation d’un échantillon en vue d’un examen.
ColorSeed™ est un flacon contenant 100
Cryptosporidium et 100 Giardia teintés de façon permanente par une fluorescence rouge (Texas Red).
Ajouté directement à l’échantillon à analyser, ColorSeed™ donne les
moyens d’un contrôle de qualité interne dont les résultats sont à comparer aux
résultats de chaque examen de détection.
ColorSeed™
est ajouté à l’échantillon, avant son traitement pour analyse selon la
méthode en vigueur dans le laboratoire (filtration, floculation, séparation
immuno- magnétique, coloration FITC, DAPI et examen microscopique). Le
microscope à épi fluorescence devra au préalable être équipé de deux filtres,
l’un pour la détection de la fluorescéine (vert), et l’autre pour la détection
du Texas Red (rouge).
Au
moment de la numération, l’opérateur scanne l’échantillon purifié pour compter
les cystes et oocystes teintés en vert. Lors de la découverte d’un parasite,
l’opérateur, en changeant pour un filtre adéquat à la détection de fluorescence
rouge, peut faire la différence entre une contamination environnementale (pas
de fluorescence rouge) et les parasites apportés par ColorSeed™ (fluorescence
rouge).
ColorSeed™
se présente sous la forme de flacons de 5 ml, contenant 100 Crypto et 100
Giardia comptés par cytométrie de flux et teintés d’une fluorescence rouge, en
solution dans 1 ml de saline. La déviation standard associée au comptage est
inférieure à 2.5 particules par tube. Les Crypto et Giardia sont inactivés par
exposition à des rayons gamma, et ColorSeed™ a une stabilité de 4 mois.
ColorSeed™
est fourni avec un certificat d’analyse donnant les caractéristiques du lot de
fabrication, dont le contrôle qualité est effectué sur 3% des flacons. Ce
contrôle qualité inclut une coloration FITC, une coloration DAPI et un comptage
physique par cytométrie de flux. L’intégrité des structures internes des
parasites est confirmée.
Chaque
lot doit être conforme aux paramètres suivants :
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Déviation standard
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< 2.5
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% de cystes/oocystes pleins
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> 95%
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Variation du poids des flacons
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< 0.10g
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% des cystes/oocystes teintés avec DAPI
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> 95%
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