BTF Precise Microbiology

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EasyStain™
 
 

EasyStainTM est un réactif immunofluorescent destiné à la détection d’oocystes de Cryptosporidium et de cystes de Giardia dans des prélèvements liquides. Lorsqu’un échantillon est coloré avec EasyStainTM, tous les oocystes et cystes présents vont apparaître en vert fluorescent (FITC). Les colorations peuvent être examinées de façons diverses : microscope à fluorescence, cytométrie de flux ou cytométrie à balayage laser.

La détection des oocystes et cystes dans les eaux est relativement difficile. De nombreuses particules présentes dans les eaux sont susceptibles de réagir avec les anticorps anti-Cryptosporidium ou anti-Giardia, dont certaines peuvent être confondues avec des oocystes ou des cystes. Alors que les autres préparations sur le marché utilisent des anticorps monoclonaux de sous classe IgM ou IgG3, susceptibles de s’attacher à des algues, des particules minérales, des bactéries et autres éléments organiques ou inorganiques présents dans les eaux, EasyStainTM utilise des anticorps monoclonaux de sous classe IgG1 qui permettent une spécificité largement supérieure, au point que jusqu'à ce jour, aucune réaction croisée ou non spécifique n’a pu être observée.

EasyStainTM est une solution qui mélange deux anticorps monoclonaux : une IgG1 anti-Cryptosporidium et une IgG1 anti-Giardia. Le réactif est prêt à l’emploi et ne requiert aucune dilution.

Le kit de détection inclut un catalyseur (identifié comme « fixing buffer ») destiné à laver les excès d’anticorps conjugués sur des lames ou des membranes. Plus qu’une simple solution de lavage, le « fixing buffer » a des propriétés particulières accroissant l’intensité et la durée de la fluorescence. Le catalyseur est aussi présenté prêt à l’emploi, sans nécessité de dilution.

La solution de contrôle positif contient des oocystes et cystes irradiés, à la concentration approximative de 200 a 400 unités par 50 µl.

Un fixateur, identifié comme « mounting medium », est utilisé comme liquide de montage. Ses propriétés particulières en font un élément important de la résistance de la coloration au temps.

Le contrôle qualité de BTF

Deux sortes de contrôles sont effectuées pour garantir la qualité de chaque lot de fabrication d’EasyStainTM :

  • Une mesure de la fluorescence relative (MFI) des oocystes et cystes colorés par EasyStainTM
  • Un contrôle de l’absence de liaisons non spécifiques des anticorps monoclonaux de chaque lot

Ces paramètres sont rapportés sur le certificat d’analyse fourni avec chaque kit

Chaque lot d’EasyStainTM doit répondre aux critères suivants :

  • Fluorescence relative (MFI), mesurée par cytométrie de flux

des Giardia

> 700

des Cryptosporidium

> 500

  • Recherche négative de particules pouvant ressembler à des Cryptosporidium ou Giardia, sur un échantillon standardisé d’eau boueuse, après coloration avec EasyStainTM.

Une assistance technique est disponible en français et en anglais aux coordonnées suivantes :
Email : contact@btfbio.com
Fax : +612 8877 9101

Nous n’avons pas de distributeurs en France et toute commande sera gérée directement depuis l’Australie par courrier express (3 jours).

 
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